Fue fundada como un club de fútbol el 29 de agostode 1926 bajo el nombre de Associazione Calcio Firenze. Desaparecido en 2002 por una fuerte crisis financiera es refundado el mismo mes bajo el nombre de Fiorentina 1926 Florentia antes de adoptar su actual denominación en 2003. A lo largo de su historia ha conquistado dos campeonatos de Liga o scudettos en las temporadas 1955-56 y 1968-69. Su palmarés nacional se completa con seis campeonatos de Copa y una Supercopa, siendo una de las instituciones futbolísticas más importantes y reconocidas en el país transalpino.

fue el primer equipo italiano en vencer en una competición organizada por la UEFA tras la obtención de la primera edición de la Recopa de Europa, siendo además uno de los trece clubes del viejo continente que ha disputado al menos una vez la final de las tres principales competiciones organizadas por el máximo organismo europeo: la Copa de Europa, la Copa de la UEFA y la ya mencionada Recopa de Europa, manteniéndose éste como el único trofeo internacional logrado por el club.

Identificado por su color violeta, del que recibe el apelativo de "viola".

La temporada 2001-02 fue la de más cambios para la entidad ya que sufrió una terrible crisis financiera que le hizo acumular una deuda de hasta 50 millones de euros provocada por la mala situación financiera de la familia Cecchi Gori, propietaria del club. Las consecuencias fueron que el equipo cayó en una quiebra que le obligó a vender a sus futbolistas más renombrados como Toldo, Batistuta o Rui Costa para la subsistencia del club, cosa que fue imposible finalmente y fue descendido administrativamente a la Serie B. Por si esto fuera poco el 1 de agosto de 2002 la Lega Calcio decide excluir de la Serie B al equipo por las altas deudas, lo que provocan además su desaparición.

Pese a que no existe reconocimiento sobre un específico partido que defina un derbi toscano, sí se denominan así cada uno de los enfrentamientos producidos entre equipos de esta región. Así, los florentinos, carentes de una rivalidad en la ciudad, centran sus contiendas contra el Siena  en el que es conocido como "derbi Guelph-Ghibelline", contra Pisa 1909, contra el Empoli  en el "derbi del Arno", o contra  Livorno Calcio siendo este último el enfrentamiento entre equipos de la Toscana más repetido en la Serie A.

Sin embargo, la mayor rivalidad del club es frente al Juventus Football Club. Ésta empezó a gestarse tras un encuentro a finales de los años veinte y que vio como iba en aumento con el paso de los partidos y temporadas hasta que alcanzó su punto más significativo en los años ochenta, con episodios como la polémica disputa de campeonatos, el traspaso de la estrella del club Roberto Baggio al equipo turinés o las tiranteces existentes entre los propietarios de cada club.